Large Accumulation of Collagen and Increased Activation of Mast Cells in Hearts of Mice with Hyperlipidemia / Grande Acúmulo de Colágeno e Aumento da Ativação de Mastócitos nos Corações de Ratos com Hiperlipidemia

Abstract Background: Hyperlipidemia, which is characterized by an elevation of lipids in the bloodstream, is a major risk factor for cardiac disease. Objectives: The present study investigated the role of fibrosis in the progression of hyperlipidemia in the mice heart, and whether mast cell activation was associated with the fibrosis process. Methods: Hyperlipidemia was produced in C57BL / 6 mice by feeding them on a high-fat diet for 8 weeks.To assess tissue fibrosis, picrosirius red staining was performed. Hematoxylin & eosin (H&E) staining was performed to identify the histopathological changes in the hearts. Immunohistochemistry was also accomplished to determine the localization of transforming growth factor (TGF)-β and α-smooth muscle actin (α-SMA). Western blotting was performed to analyze the expression of chymase, tryptase, TGF-β, α-SMA and activity of Wnt/β-catenin pathway. At the end, serum total cholesterol (TC) and triglycerides (TG) levels were measured. All the values were expressed as means ± SD, the statistical significance level adopted was 5%. Results: Hyperlipidemia mice showed significantly increased collagen deposition in the hearts compared with normal mice. In addition, H&E staining showed significant cellular degeneration. Cardiac muscle was arranged in disorder with fracture in mice of the model group. Immunohistochemistry and western blot analysis revealed that expression levels of tryptase, chymase, β-catenin, TGF-β and α-SMA were significantly increased in the hyperlipidemia mice compared with the control group. Conclusions: The results indicated that mast cell activation might induce cardiac fibrosis by tryptase and chymase in hyperlipidemia, which had a close relationship with the increased activity of TGF-β/Wnt/β-catenin pathway.

Resumo Fundamentos: A hiperlipidemia, que se caracteriza por uma elevação dos lipídeos na corrente sanguínea, é um importante fator de risco para a doença cardíaca. Objetivos: O presente estudo investigou o papel da fibrose na progressão da hiperlipidemia no coração do rato e se a ativação dos mastócitos estava associada ao processo de fibrose. Método: A hiperlipidemia foi produzida em ratos C57BL/6 alimentando-os com uma dieta rica em gordura durante 8 semanas. Para avaliar a fibrose tecidual, foi realizada coloração vermelha picro-Sirius. A coloração com hematoxilina e eosina (H & E) foi feita para identificar as alterações histopatológicas nos corações. A imuno-histoquímica também foi levada a cabo para determinar a localização do fator de crescimento transformante (TGF) -β e α-actina do músculo liso (α-SMA). O Western Blot foi realizado para analisar as expressões de quimase, triptase, TGF-β, α-SMA e a atividade da via Wnt / β-catenina. Finalmente, se mediram os níveis séricos de colesterol total (TC) e triglicerídeos (TG). Todos os valores foram expressos como média ± DP, o nível de significância estatística adotado foi de 5%. Resultados: Os ratos hiperlipidêmicos mostraram aumento significativo da deposição de colágeno nos corações em comparação com ratos normais. Além disso, a coloração de H & E mostrou degeneração celular significativa. O músculo cardíaco estava em desordem com ruptura de fibras em ratos do grupo modelo. A análise imuno-histoquímica e o Western Blot revelaram que os níveis de expressão de triptase, quimase, β-catenina, TGF-β e α-SMA estavam significativamente aumentados nos ratos hiperlipidêmicos em comparação com o grupo controle. Conclusões: Os resultados indicaram que a ativação de mastócitos pode induzir fibrose cardíaca por triptase e quimase em hiperlipidemia, a qual teve uma relação estreita com a atividade aumentada da via TGF-β / Wnt / β-catenina.

Inflammatory mediators in nasal lavage among school-age children from urban and rural areas in São Paulo, Brazil

CONTEXTO: Alguns estudos demonstram que o processo inflamatório nas vias aéreas nasais poderia refletir ou mesmo afetar as vias aéreas inferiores. Decidimos avaliar indiretamente o estado inflamatório das vias aéreas nasais de dois grupos de escolares com diferente sensibilização aos aeroalérgenos mais comuns. OBJETIVO: Comparar a atividade inflamatória nas vias aéreas nasais, através da determinação de mediadores inflamatórios no lavado nasal em duas populações distintas de crianças em idade escolar. TIPO DE ESTUDO: Estudo transversal. LOCAL: O estudo foi realizado em duas escolas públicas de ensino fundamental, uma em zona urbana e outra em zona rural, no Estado de São Paulo. MÉTODOS: Foram constituídos dois grupos de 40 escolares que apresentam diferentes taxas de sensibilização a aeroalérgenos comuns. Amostras do lavado nasal foram colhidas para determinação de proteína catiônica eosinofílica (ECP) e triptase. Testes não-paramétricos foram usados na análise estatística. RESULTADOS: Níveis significativamente maiores de proteína catiônica eosinofílica foram encontrados nos estudantes da área urbana (p < 0,05). Não houve diferença estatística nos níveis de triptase entre os dois grupos. Observou-se ainda que, na área urbana, as crianças sensibilizadas aos aeroalérgenos apresentaram maiores concentrações de proteína catiônica eosinofílica, o que não foi observado nas crianças da zona rural. DISCUSSAO: A ausência de atividade de mastócitos e a degranulação aumentada de eosinófilos revelaram uma inflamação crônica nas vias aéreas das crianças estudadas. A maior atividade de eosinófilos na zona urbana, coincidindo com a maior sensibilização aos aeroalérgenos, sugere que deve haver algum fator a mais na área urbana que modula a resposta das vias aéreas influenciando a ativação das células inflamatórias locais. CONCLUSAO: Nossos achados não mostraram diferenças nos níveis de triptase no lavado nasal entre os dois grupos estudados. Por outro lado, as crianças da area urbana apresentaram maiores concentrações de proteína catiônica eosinofílica do que aquelas da zona rural. Observamos ainda que, na area urbana, as crianças sensibilizadas por aeroalérgenos apresentaram maiores concentrações de proteína catiônica eosinofílica do que aquelas não sensibilizadas, enquanto esta diferença não foi observada nas crianças da area rural.

Hiperplasia de mastócitos na oxalose óssea / Incresead mast cell number in oxalosis of bone

Objetivos. Avaliar através de técnicas de hitomorfometria a incidência de hiperplasia de mastócitos na medula óssea de pacientes portadores de oxalose e insuficiência renal crônica. Material e Métodos. Foram estudados 18 indivíduos em 3 grupos: 6 (4 homens e 2 mulheres com média de idade de 26.31+2.5 anos) portadores de oxalose óssea e insuficiência renal crônica (IRC); 6 (5 mulheres e 1 homem com idade média de 22.1+3.56 anos) portadores de IRC e 6 indivíduos saudáveis (5 homens e 1 mulher com idade média de 23+2.78 anos). A análise do tecido ósseo foi realizada em biópsias de crista ilíaca, incluídas em resina, sem descalcificaçao prévia e coradas pela técnica do Azul de Toluidina. A contagem dos mastócitos foi feita utilizando-se sistema analisador de imagens e os valores (média+DP) foram expressos sob a forma de células por mm2 de tecido. Resultados. O número de mastócitos foi significativamente maior nos portadores de oxalose óssea, 32.67+9.59, ao comparar com os pacientes portadores de IRC sem oxalose (20.84+5.04, p<0.05) e nos indivíduos do grupo controle (3.26+1.03, p<0.001). Conclusoes. A oxalose óssea está associada com um aumento substancial do número de mastócitos na medula óssea. Esta alteraçao nao está relacionada com a IRC per se e nao parece representar uma resposta inespecífica à fibrose medular. O acúmulo anormal de mastócitos deve, de alguma forma, contribuir para o desenvolvimento da fibrose de medula óssea que acompanha esta condiçao.